Mesipistiäiset (Anthophila, aiemmin Apidae) ovat kooltaan vaihtelevia, useimmiten karvaisia ja melko tukevarakenteisia myrkkypistiäisiä (Aculeata). Mesipistiäisillä on muiden myrkkypistiäisten tavoin munanasettimesta kehittynyt pistin, johon avautuu myrkkyä tuottava rauhanen. Karvaisuuden ja tukevamman rakenteen puuttuessa mesipistiäiset erottaa parhaiten muista myrkkypistiäisistä siten, että mesipistiäisillä takanilkan tyvijaoke on leveämpi ja litteä.

Mesipistiäisten karvoitus on usein melko tuuheaa ja värillistä, ja osa karvoista on haaraisia. Niiden etuselkä ei yllä olkakyhmyihin, ja takaruumis on kapean vyötärön keskiruumiista erottama, muiden hoikkatyvisten (Apocrita) pistiäisten tapaan. Suuosissaan mesipistiäisillä on imukärsä, jonka kärjessä on pituudeltaan vaihteleva kieli (glossa). Päälaella sijaitsevat kolme pistesilmää, ja pään sivuja reunustavat suuret verkkosilmät. Tuntosarvet ovat polvitaitteiset ja siivet ovat kalvomaiset, takasiivet etusiipiä pienemmät, kuten pistiäisillä yleensä. Mesipistiäisten naarailla (poislukien pesävieraat) on siitepölyvasut takaruumiin vatsapuolella tai takajalkojen säärissä.

Mesipistiäisten toukat ovat paksuja ja raajattomia sekä pienipäisiä.